miR-181a-5p和BACH2表达对白血病CCRF-CEM细胞凋亡和侵袭的影响
目的:探讨微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)靶向BTB与CNC同源基因 2(BACH2)对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞凋亡和侵袭的调控作用,并阐明其作用机制.方法:体外构建BACH2过表达重组质粒(overExpBACH2)、miR-181a-5p inhibitor和inhibitor-NC,转染人ALL T淋巴细胞CCRF-CEM,实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)法和免疫荧光染色检测转染效果.将CCRF-CEM 细 胞 分 为 对 照 组、inhibitor-NC 组、miR-181a-5p inhibitor 组、BACH2 过 表 达(overExpBACH2)组、miR-181a-5p inhibitor+ 空 载 体(EV)组 和 miR-181a-5p inhibitor+ overExpBACH2组.CCK-8法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测G2 期细胞百分率和细胞凋亡率.Western blotting法检测各组细胞中细胞周期蛋白D3(CyclinD3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达水平,Transwell小室实验检测各组细胞中侵袭细胞数,RT-qPCR法检测各组细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶 14(MMP-14)和BACH2 mRNA及miR-181a-5p表达水平.结果:miR-181a-5p inhibitor和overExpBACH2 质粒均成功转染 CCRF-CEM 细胞.与对照组比较,miR-181a-5p inhibitor 组、overExpBACH2组、miR-181a-5p inhibitor+EV组和miR-181a-5p inhibitor+overExpBACH2组细胞增殖活性明显降低(P<0.05),G2 期细胞百分率和细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中CyclinD3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值明显升高(P<0.05),侵袭细胞数明显减少(P<0.05),细胞中MMP-9和MMP-14 mRNA及miR-181a-5p表达水平明显降低(P<0.05),BACH2 mRNA 表达水平明显升高(P<0.05).与miR-181a-5p inhibitor组和overExpBACH2组比较,miR-181a-5p inhibitor+overExpBACH2组细胞中上述指标变化趋势更明显.结论:miR-181a-5p可靶向BACH2进而调控ALL细胞侵袭和凋亡,为临床靶向治疗ALL提供了新的靶点.
急性淋巴细胞白血病、微小RNA-181a-5p、BTB与CNC同源基因2、细胞凋亡、细胞侵袭
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R733.7(肿瘤学)
国家自然科学基金31600111
2023-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共10页
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