ADAM10在人动静脉内瘘狭窄处血管组织中的表达及其对血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响
目的:探讨去整合素金属蛋白酶10(ADAM10)在人动静脉内瘘(AVF)狭窄处血管组织中的表达及其对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和迁移的影响,并阐明其可能的分子机制.方法:收集42例因AVF狭窄再次接受手术治疗的终末期肾病(ESRD)患者狭窄静脉血管组织(AVF组)及其首次手术的正常静脉血管组织(正常对照组).采用免疫组织化学法检测2组患者静脉血管组织中ADAM10蛋白表达情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组患者静脉血管组织中ADAM10 mRNA表达水平.将VSMCs分为对照组、模型组[脂多糖(LPS)组,给予10 mg·L-1 LPS]、LPS+si-NC组(转染si-NC质粒+10 mg·L-1 LPS)、LPS+si-ADAM10组(转染si-ADAM10质粒+10 mg·L-1 LPS)、LPS+Notch信号通路抑制剂DAPT组(10 mg·L-1 LPS+10μmol·L-1 Notch信号通路抑制剂DAPT)和LPS+si-ADAM10+DAPT组(转染si-ADAM10质粒+10 mg·L-1 LPS+10μmol·L-1 DATP),CCK-8法检测各组细胞增殖活性,Transwell法检测各组迁移细胞数,Western blotting法检测各组细胞中ADAM10、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、Notch同源蛋白1(Notch1)、Notch细胞内片段(NICD)和发状分裂相关增强子1(Hes1)蛋白表达水平.结果:与正常对照组比较,AVF组患者静脉血管组织中ADAM10蛋白表达量明显增加,ADAM10 mRNA表达水平明显增加(P<0.05).与对照组比较,LPS组细胞增殖活性和迁移细胞数及细胞中ADAM10、PCNA、MMP-9、Notch1、NICD和Hes1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与LPS组和LPS+si-NC组比较,LPS+si-ADAM10组细胞增殖活性和迁移细胞数及细胞中ADAM10、PCNA、MMP-9、Notch1、NICD和Hes1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05).与LPS组比较,LPS+si-ADAM10组和LPS+DAPT组细胞增殖活性和细胞迁移数量及细胞中PCNA、MMP-9、Notch1、NICD和Hes1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);与LPS+si-ADAM10组比较,LPS+si-ADAM10+DAPT组细胞增殖活性和细胞迁移数及细胞中PCNA、MMP-9、Notch1、NICD和Hes1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05).结论:ADAM10在人AVF狭窄处血管组织中高表达,沉默ADAM10基因表达可抑制LPS诱导的VSMCs增殖和迁移,其作用机制可能与阻断Notch信号通路有关.
去整合素金属蛋白酶10、动静脉内瘘、血管平滑肌细胞、细胞增殖、细胞迁移
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R34(人体生物化学、分子生物学)
河北省科技厅重点研发计划项目21377747D
2023-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共10页
482-491
