贝母素乙对肺癌A549细胞凋亡的诱导作用及其机制
目的:探讨不同浓度贝母素乙(PMI)对人肺癌A549细胞凋亡的影响,阐明其可能的分子机制.方法:采用不同浓度PMI(0.025、0.050、0.100、0.200和0.400 mmol·L-1)分别处理A549细胞24、48和72 h,MTT法检测A549细胞增殖活性,并计算半数抑制浓度(IC50).不同浓度PMI(0.050、0.100、0.200 mmol·L-1)或0.200 mmol·L-1 PMI联合p38 MAPK抑制剂SB203580处理A549细胞48 h后,细胞分为空白对照组、不同浓度(0.050、0.100和0.200 mmol·L-1)PMI组和联合组(0.200 mmol·L-1 PMI+20μmol·L-1 SB203580).AnnexinⅤ-FITC/PI法检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和cleaved-caspase-3及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/p53信号通路相关蛋白磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)(Thr180/Thr182)、p-p53(ser15)、p53、PUMA和小鼠双微体2(MDM2)表达水平,免疫荧光实验观察各组细胞中p53蛋白定位情况.结果:与对照组比较,0.10和0.20 mmol·L-1 PMI组A549细胞存活率降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中Bax、cleaved-caspase-3、p-p38MAPK(Thr180/Thr182)、p-p53(ser15)、p53和PUMA蛋白表达水平均升高(P<0.05),Bcl-2和MDM2蛋白表达水平均降低(P<0.05).与0.20 mmol·L-1 PMI组比较,联合组A549细胞存活率升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),细胞中Bax、cleaved-caspase-3p-p38MAPK(Thr180/Thr182)、p-p53(ser15)、p53和PUMA蛋白表达水平均降低(P<0.05),Bcl-2和MDM2蛋白表达水平均升高(P<0.05).免疫荧光检测,p53蛋白存在由细胞质向细胞核转移的现象,且p53蛋白在细胞质和细胞核均有表达.结论:PMI可诱导A549细胞凋亡,其分子机制可能与p38 MAPK/p53信号通路介导的细胞凋亡有关.
贝母素乙、肺肿瘤、p38丝裂原活化蛋白激酶、p53、细胞凋亡
48
R734.2(肿瘤学)
海南省科技厅重点研发计划项目ZDYF2018172
2022-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
711-717
