人脐带间充质干细胞对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制

摘要：

目的:探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的作用机制.方法:分离培养人脐带MSCs,采用光学显微镜观察细胞形态表现,并采用流式细胞仪分析鉴定其表面抗原标记物CD90、CD105、CD34和CD45的表达,以未加一抗仅加二抗的MSCs为平行对照组.将20％和60％浓度的MSCs条件培养基和宫颈癌HeLa细胞共培养72 h,集落形成实验观察MSCs条件培养基作用下HeLa细胞集落的形成能力;CCK-8实验检测HeLa细胞增殖抑制率;流式细胞术检测HeLa细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测MSCs条件培养基作用下HeLa细胞增殖和凋亡相关基因蛋白表达水平.结果:脐带分离细胞接种72 h后有少量细胞贴壁,1周后逐渐变成扁平单层细胞,呈簇状和旋涡状生长,伴随细胞密度增加,细胞体随之变细长,形态与成纤维细胞类似.MSCs细胞表面抗原标记物CD90和CD105呈阳性表达,CD34和CD45呈阴性表达,符合干细胞表型.集落形成实验,加入20％和60％的MSCs条件培养基,宫颈癌HeLa细胞集落形成的抑制率分别为18.56％和37.64％.与对照组比较,MSCs处理48 h后宫颈癌HeLa细胞早期凋亡率升高(P<0.05).MSCs处理0、24和48 h后HeLa细胞中半胱天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)和P53蛋白表达水平持续升高(P<0.05),B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白相对表达水平持续降低(P<0.05).结论:MSCs体外可抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,并诱导HeLa细胞凋亡,其机制可能与上调促凋亡分子caspase-3与P53表达、下调抗凋亡因子Bcl-2表达有关.

关键词：宫颈肿瘤;人脐带间充质干细胞;细胞增殖;细胞凋亡

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分类号：R285.5;R737.33(中药学)

资助基金：河南省科技厅重点科技攻关项目182102311175

在线出版日期：2021-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1187-1193