吡柔比星对大鼠心肌细胞的损伤作用及其模型建立
目的:探讨吡柔比星(THP)对大鼠心肌细胞的损伤作用,阐明THP诱导心肌细胞损伤模型的建立方法.方法:常规体外培养大鼠心肌细胞H9C2,将细胞分为空白对照组和不同浓度(1×10-6 mol·L-1、1×10-5 mol·L-1、1×10-4 mol·L-1、1×10-3 mol·L-1和1μmol·L-1、3μmol·L-1、5μmol·L-1、7μmol·L-1、9μmol·L-1和10μmol·L-1 THP组,采用不同浓度THP处理细胞,并在6、12、24、36和48 h时间点采用CCK-8法检测各组细胞存活率,DCFH-DA活性氧(ROS)探针法检测细胞中ROS水平,硫代巴比妥酸比色法检测各组细胞中丙二醛(MDA)水平,黄嘌呤氧化法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性,二硝基苯肼显色法检测各组细胞中乳酸脱氢酶(LDH)活性,TUNEL染色法检测各组细胞凋亡率,qRT-PCR法检测各组细胞中B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)和半胱氨酸蛋白酶9(Caspase-9)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中Bax、Bcl-2、活化型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)和活化型Caspase-9(Cleaved Caspase-9)蛋白表达水平.结果:与空白对照组比较,1、5和9μmol·L-1 THP组H9C2细胞存活率降低(P<0.05或P<0.01),细胞中ROS和MDA水平及LDH活性升高(P<0.05或P<0.01),SOD活性降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中Bax、Caspase-3和Caspase-9 mRNA表达水平升高(P<0.05或P<0.01),Bcl-2 mRNA表达水平降低(P<0.05),Bax、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.01).结论:THP对大鼠心肌细胞具有损伤作用,其中5μmol·L-1是THP诱导H9C2细胞损伤模型的最佳造模浓度.
吡柔比星、心肌细胞、疾病模型、动物、细胞凋亡、细胞损伤
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R331(人体生理学)
吉林省科技厅科技发展计划项目资助课题20190304078YY
2020-10-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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948-954
