最低限度免疫定义基因表达的HCV多表位DNA疫苗对小鼠细胞免疫的诱导作用
目的:探讨采用最低限度免疫定义基因表达法制备丙型肝炎病毒(HCV)多表位 DNA疫苗的可行性,阐明该方法在疫苗领域可能的应用价值。方法:采用人工合成和 PCR 方法制备长度为1346 bp 的含有CMV启动子、HCV 1b亚型多表位和牛生长激素(BCG)多聚腺苷酸序列的最低限度免疫定义基因表达 DNA疫苗,命名为M-HCV-epi;同时制备结构基因被非 HCV同源的DNA序列替换的相同长度DNA片段作为对照,命名为V-pcDNA3.1。12只ICQ小鼠随机分为实验组(n=6)和对照组(n=6),分别采用M-HCV-epi DNA和V-pcDNA3.1 DNA各20μg皮下注射。QRT-PCR法检测免疫后小鼠脾细胞中干扰素γ(IFN-γ)mRNA的表达水平;人工合成3个 HCV 1b亚型表位多肽和1条对照多肽。用上述合成的多肽刺激免疫后小鼠脾细胞,ELISA法检测脾细胞刺激上清中 IFN-γ水平。结果:与对照组比较,实验组小鼠脾细胞中 IFN-γmRNA表达水平升高(1.50±0.18)倍(P<0.05);加入 aa35-44多肽的实验组小鼠脾细胞培养上清中 IFN-γ水平较对照组明显升高(P<0.05)。结论:最低限度免疫定义基因表达法制备 HCV多表位 DNA疫苗可诱导细胞免疫反应,该方法在DNA疫苗领域可能具有应用价值。
最低限度免疫定义基因表达、丙型肝炎病毒、多表位、DNA疫苗、干扰素γ
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Q813(生物工程学(生物技术))
吉林省科技厅科研基金资助课题20130413003GH
2016-12-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1071-1075