miR-196a在肝癌细胞中的表达及其促增殖作用

摘要：

目的:探讨miR-196a在肝癌组织的表达水平和对肝癌Hep3B细胞增殖的影响,阐明其促进肝癌细胞增殖的可能机制.方法:收集20例肝癌组织及对应癌旁组织,培养人正常肝细胞株L02及肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2和Hep3B,采用qRT PCR法检测miR-196a mRNA在肝癌组织和对应癌旁组织及肝癌细胞株中的表达水平.取处于对数生长期人肝癌Hep3B细胞随机分为对照组、miR-196a mimics转染组和miR-196ainhibitors转染组,MTT法检测各组Hep3B细胞增殖活力,qRT-PCR法检测各组Hep3B细胞miR-196a的表达,流式细胞术检测各组Hep3B细胞周期变化,qRT-PCR和Western blotting法检测各组Hep3B细胞miR-196a潜在靶点叉头转录因子(FOXO1)的表达水平.结果:肝癌组织中miR-196amRNA表达水平明显高于相应癌旁组织(P＜0.05);miR-196a mRNA在人肝癌SMMC-7721、HepG2和Hep3B细胞中的表达水平明显高于人正常肝L02细胞(P＜0.05).与对照组比较,miR-196a mimics转染组Hep3B细胞中miR-196amRNA表达水平明显升高(P＜0.05),而miR-196a inhibitors转染组Hep3B细胞中miR-196a mRNA的表达水平明显降低(P＜0.05).与对照组比较,miR-196a mimics转染组Hep3B细胞增殖率明显升高(P＜0.05),miR-196a inhibitors转染组Hep3B细胞增殖率明显降低(P＜0.05),且呈时间依赖性.与对照组比较,转染24 h时,miR-196a inhibitors转染组Hep3B细胞G0/G1期细胞百分率明显升高(P＜0.05),S期细胞百分率明显降低(P＜0.05).与对照组比较,miR-196a mimics转染组FOXO1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P＜0.05).结论:miR-196a可能通过FOXO1促进肝癌细胞的增殖,提示miR-196a可能成为肝癌诊断和治疗的新靶点.

关键词：miR-196a、叉头转录因子FOXO1、肝肿瘤、细胞增殖

所属期刊栏目：41

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：吉林省科技厅科研基金资助课题3D512K903430

在线出版日期：2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：120-124