RNA干扰对HeLa细胞VEGF表达和细胞增殖的影响
目的:探讨RNA干扰对HeLa细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达和细胞增殖的影响,为人宫颈癌的治疗提供理论依据.方法:构建针对VEGF165的RNA干涉质粒,稳定转染HeLa细胞,设HeLa组、对照组和干涉组,用RT-PCR方法检测稳定细胞株中VEGF mRNA的表达,Western blotting和ELISA方法检测VEGF165蛋向的表达,MTT及流式细胞术检测VEGF siRNA作用下的细胞增殖,Hoechst33342染色检测VEGF siRNA作用下细胞凋亡的变化.结果:成功建立了VEGF siRNA的稳定细胞株,与对照组比较,干涉组VEGF的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05).与对照组比较,稳定转染VEGF siRNA的细胞株在24、48和72 h的细胞生长抑制率分别为12.8%±5.4%、17.4%±3.7%和27.2%±5.7%,细胞增殖明显受到抑制(P<0.01).与对照组比较,Hoechst33342染色显示VEGF siRNA对HeLa细胞的细胞凋亡率没有影响.结论:VEGF siRNA可以有效抑制HeLa细胞中VEGF mRNA和蛋白的表达,抑制细胞的增殖,提示VEGF在宫颈癌的发生、发展中具有重要作用,抑制VEGF的表达有望成为一种治疗宫颈癌的途径.
HeLa细胞、血管、内皮生长因子、RNA干涉、细胞增殖
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金资助课题30700758;吉林省发改委产业技术研究与开发专项基金资助课题吉发改高技字[2007]1033号
2015-09-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
996-1001