高迁移率蛋白A2基因真核表达载体构建与表达鉴定

摘要：

目的:构建高迁移率蛋白A2(HMGA2)基因的真核表达载体,观察其在真核细胞中的表达,为进一步研究HMGA2基因功能奠定理论基础.方法:采用RT-PCR方法从人乳腺上皮HBL-100细胞中扩增HMGA2基因全长cDNA,扩增产物经双酶切及凝胶回收后,直接克隆至黄绿色荧光真核表达载体YFP-C1中,构建YFP-C1-HMGA2重组质粒.将YFP-C1-HMGA2真核表达载体转染到人前列腺癌PC3细胞中,通过RT-PCR方法验证所构建的真核表达质粒YFP-C1-HMGA2的正确性.结果:RT-PCR获得长度为351 bp的HMGA2全长cDNA,经YFP-C1真核表达载体克隆、酶切鉴定及测序分析,测序结果示基因序列与GenBank序列一致,证实真核表达质粒YFP-C1-HMGA2构建成功,并且能够在真核细胞中表达.结论:成功克隆了HMGA2基因,构建了YFP-C1-HMGA2重组质粒.

关键词：HMGA2蛋白、真核细胞、载体构建、转染

所属期刊栏目：35

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金资助课题30872193

在线出版日期：2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：975-978,封2