小鼠LIF编码基因的克隆与真核表达载体pcDNA3.1-LIF的构建

摘要：

目的:通过克隆小鼠LIF编码基因,构建pcDNA3.1-LIF真核表达载体,为下一步建立转基因动物模型奠定基础.方法:采用ICR雌性小鼠子宫组织,提取总RNA,运用RT-PCR技术,扩增出小鼠LIF基因全长编码序列,采用同源重组方法构建具有新霉素抗性的小鼠LIF真核表达载体peDNA3.1-LIF.结果:通过PCR获得了约612 bp大小的特异性cDNA片段.经核苷酸序列分析,扩增得到的片段与小鼠LIF cDNA序列同源性为100%.经PCR及酶切鉴定筛选阳性克隆菌,表明LIF编码序列正确连入pcDNA3.1载体中.结论:成功克隆了小鼠LIF编码基因,并构建了真核表达载体pcDNA3.1-LIF.

关键词：白血病抑制因子、聚合酶链反应、基因克隆、真核表达载体、小鼠、近交ICR

所属期刊栏目：34

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省科技厅科技发展计划项目资助课题200705347

在线出版日期：2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：782-785