辐射诱导人TRAIL基因表达的腺病毒穿梭质粒的构建及鉴定

摘要：

目的:构建辐射敏感Egr-1启动子诱导人肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因表达的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-hTRAIL.方法:利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法从pACCMV-hTRAIL质粒中扩增得到TRAIL基因片段,并将其连接到pMD19T载体进行测序,利用基因重组技术构建含有辐射诱导启动子Egr-1的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-hTRAIL.结果:PCR扩增出约820bp的片段,测序结果证实扩增片段的序列与GenBank公布(NM-003810)的一致.pshuttle-Egr1-hTRAIL用EcoR I、 Kpn I双酶切重组得到大小为3540和4299bp的2个片段,用Sma I酶切得到1517、2282和4040bp的3个片段,用BamH I酶切得到3304和4535bp的2个片段,与预期结果完全一致.结论:成功克隆了hTRAIL基因,并构建了辐射诱导表达的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-hTRAIL.

关键词：TRAIL、克隆、分子、腺病毒、辐射、Egr-1

所属期刊栏目：34

分类号：R730.55;Q78(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30570546

在线出版日期：2008-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：364-368