重组可溶性TRAIL的表达及其诱导A549和H460wt细胞凋亡

摘要：

目的:获得人重组可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rsTRAIL)蛋白,并探讨其应用于非小细胞肺癌(NSCLC)治疗的前景.方法:RT-PCR从外周血单核细胞(PBMCs)中获取目的基因片段,构建重组质粒PQEh30-TRAIL并转化人大肠杆菌(E.coli)M15,IPTG诱导目的蛋白表达并经镍固定金属亲和层析纯化,MTT法检测细胞增殖情况,荧光显微镜观察H460wt细胞的形态学改变,流式细胞仪检测其凋亡率.结果:获得与GenBank中报道一致的TRAIL基因片段.SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析显示,获得具有TRAIL免疫原性、相对分子质量约为21 000目的蛋白.Ni2+-NTA agarose纯化得到单一条带蛋白.rsTRAIL处理H460wt细胞24 h后,细胞凋亡率为43.2%,顺铂可以增强rsTRAIL对A549细胞的杀伤作用.结论:获得了与天然TRAIL蛋白具有相同生物学活性的目的蛋白,该目的蛋白具有诱导NSCLC细胞凋亡的作用,联合顺铂能够增强rsTRAIL对NSCLC的杀伤作用.

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体、细胞凋亡、癌、非小细胞肺、顺铂

所属期刊栏目：34

分类号：Q78;R734.2(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省杰出青年科学基金20050113;吉林省科技厅国际合作项目20060722

在线出版日期：2008-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：270-273