人肝细胞生长因子真核表达载体的构建及在COS7细胞中的表达

摘要：

目的:构建人肝细胞生长因子(HGF)的真核表达载体,并在COS7细胞中进行表达.方法:利用PCR技术扩增HGF基因,与PCI-Neo载体连接,构建成重组真核表达载体PCI-neo-HGF,应用限制性内切酶法及测序方法进行鉴定.利用脂质体将PCI-HGF转入COS7细胞系中,用ELISA法检测培养液上清中的HGF的表达水平.结果:重组真核表达载体PCI-neo-HGF经限制性内切酶分析,片段与理论值相符,测序结果与GenBank对比,HGFcDNA序列同源性99%,插入正确;将重组真核表达载体PCI-neo-HGF转染COS7细胞,于转染12 h开始有表达,36～72 h表达量较高(约2 000 ng·L-1),以后逐渐下降.结论:成功构建了带有HGF基因真核表达载体,并能在转染细胞中表达.

关键词：肝细胞生长因子、遗传载体、基因表达、COS细胞

所属期刊栏目：33

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省科技厅科研项目99031601

在线出版日期：2007-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：297-300