A novel peptides, like nerve growth factor, inducing pheochromocytoma PC12 cell differentiation
目的:根据NGF的氨基酸序列及其晶体构象资料,对NGF-β进行限制性酶解,从而获得关键的功能区域片段.方法:选择CNBr在9位Met处, Trypsin在Arg或Lys处裂解NGF-β,用 Sephadex G50层析、DE52离子交换层析和反相高压液相层析进行分离纯化.所得肽片段用PC12细胞测定活性,对活性片段进行氨基酸组成分析及氨基酸序列分析.结果:从NGF-β裂解片段中获得一可诱导PC12细胞分化的活性片段,氨基酸组成分析及氨基酸序列分析此片段由16肽GEFSVCDSVSVWVGDK与14肽HWNSYCTTTHTFVK通过一对二硫键连接而成,与NGF-β肽链的10~25和75~88氨基酸残基序列相对应.生物活性分析表明其最佳作用浓度为0.001~0.1 μg*L-1.结论:本实验获得了NGF-β关键的功能区域片段.虽然其空间结构和其功能的关系尚需研究探讨,但它的成功分离和鉴定为合成或表达高活性小分子神经营养物质奠定了关键的基础.
nerve growth factor、Amino Acid、氨基酸序列、isolation and purification、exchange chromatography、活性片段、组成分析、序列分析、功能区域、activity assay、离子交换层析、高压液相层析、the optimum、sequence of、分离和鉴定、cell line、作用浓度、营养物质、细胞分化、生物活性
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Q516;Q74(蛋白质)
国家自然科学基金39730310;W.J.Science FoundationWKH-99-090
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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