人bFGF基因克隆表达及表达产物的纯化和生物学活性分析

摘要：

目的:通过融合蛋白表达方式将编码人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)cDNA在大肠杆菌DH5α中的表达,为bFGF进一步研究提供材料来源.方法:用多聚酶链反应(PCR)及DNA重组技术将PCR产物克隆到pGEM-5Z载体并测序,然后克隆到表达载体pXH上.结果:转化重组质粒pLX1的大肠杆菌经42℃温控诱导4～5 h,SDS-PAGE分析显示融合蛋白的分子量约35 000,薄层扫描分析表明该蛋白占菌体总蛋白量的9.9%.经Factor Xa酶切后得到分子量约为17 000的bFGF,其生物学活性ED50为2.29 ng/ml.结论:经PCR方法扩增的bFGF可在大肠杆菌中高效表达,为其进一步结构与功能研究打下基础.

关键词：人碱性成纤维细胞生长因子、高效表达、纯化

所属期刊栏目：25

分类号：R392.2

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：11-13