拟南芥AtGrp7RRM结构域的纯化及其结构与结合的初步分析(英文)

摘要：

富含甘氨酸的RNA结合蛋白AtGrp7是拟南芥(Arabidopsis thaliana)调节生物钟负反馈回路的组分.在使用常规方法纯化AtGrp7 RRM结构域的初始试验中,观察到烟草蚀纹病毒(TEV)酶切后AtGrp7 RNA识别基序(RRM)结构域的紫外吸收峰为蛋白和杂质的混合信号峰.为解决常规纯化中的杂质问题,对AtGrp71-90应用了变性-复性两步纯化方法.AtGrp7 RRM结构域的1H-15N HSQC指纹谱和CS-Rosetta模型结构表明快速稀释重折叠后其结构完全恢复.等温滴定量热法(ITC)和核磁共振(NMR)滴定实验进一步证实,重折叠后AtGrp71-90 RRM结构域具有正确结合RNA/DNA的功能.

关键词：变性-复性、快速稀释、核磁共振(NMR)、AtGrp7RNA识别基序(RRM)结构域、结合分析

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分类号：O482.53(固体物理学)

资助基金：The Liaoning Natural Science Foundation20170520198,20170520043;Project Supported by the State Key Laboratory of Magnetic Resonance and Atomic and Molecular PhysicsT151601

在线出版日期：2019-06-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共14页

页码：1-14