基于TMT蛋白质组学探讨黄精多糖对顺铂诱导C2C12细胞肌管萎缩的作用机制

摘要：

目的 基于串联质量标签(TMT)标记的定量蛋白质组学研究黄精多糖改善顺铂诱导小鼠成肌细胞(C2C12 细胞)肌管萎缩的蛋白质代谢轮廓,探讨黄精多糖的作用机制.方法 将C2C12 细胞培养至肌管,分为4 组:正常组、顺铂组、黄精多糖组、顺铂+黄精多糖组.按如下方法处理.正常组:不含血清的高糖DMEM培养基;顺铂组:不含血清的高糖DMEM培养基+50 μmol/L顺铂;黄精多糖组:不含血清的高糖DMEM培养基+0.200 mg/L黄精多糖;顺铂+黄精多糖组:不含血清的高糖DMEM培养基+50 μmol/L顺铂+0.200 mg/L黄精多糖.各组均避光培养24 h.CCK8 法检测C2C12 细胞活力,免疫荧光法检测肌管直径和细胞融合指数,TMT蛋白质组学表征黄精多糖改善顺铂致C2C12 细胞肌管萎缩的蛋白质代谢轮廓.结果 CCK8 法结果显示,黄精多糖可促进C2C12 细胞活力,顺铂致C2C12 肌管萎缩的造模浓度为 50 μmol/L,黄精多糖的给药质量浓度为0.200 mg/L.免疫荧光法结果显示,与顺铂组比较,顺铂+黄精多糖组萎缩肌管的直径和融合指数升高(P<0.01).蛋白质组学结果显示,以磷酸泛酰-半胱氨酸连接酶、双功能损伤控制性磷酸酶、2-磷酸-D-甘油酸水解酶、CCR4-NOT转录复合体亚基 9 为代表的 43 个蛋白在正常组、顺铂组和顺铂+黄精多糖组3 组间发生了连续性的调节变化,核糖体、鞘脂类代谢、鞘糖脂生物合成相关代谢通路调节在黄精多糖改善顺铂所致的C2C12 肌管萎缩中作用明显.结论 黄精多糖能改善顺铂所致C2C12 肌管萎缩,其机制可能与下调鞘磷脂磷酸二酯酶2 介导的神经酰胺积累有关.

关键词：黄精、多糖、成肌细胞、顺铂、萎缩、蛋白质组学

所属期刊栏目：46

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;湖南创新型省份建设专项

在线出版日期：2023-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：790-800