忍冬藤水提物冻干粉调控共培养体系中大鼠T淋巴细胞迁移机制研究

摘要：

目的 探讨忍冬藤水提物冻干粉调控共培养体系中大鼠T淋巴细胞迁移的作用机制.方法 Transwell建立大鼠外周血T淋巴细胞与大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞共培养体系,白细胞介素-1β(25μg/L)诱导细胞成炎性损伤模型,以忍冬藤水提物冻干粉(100、250 mg/L)作为干预措施,白细胞介素-1β抑制剂(25μg/L)作为阳性对照.采用高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI/MS)检测忍冬藤水提物组分,HE染色观察滑膜细胞形态改变,实时动态细胞分析技术(RTCA)检测淋巴细胞迁移指数变化,流式细胞仪检测CD3+CD4+T细胞及CD3+CD8+T细胞百分比变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测共培养体系中可溶性血管内皮黏附分子-1(sVCAM-1)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)浓度.结果 HPLC-ESI/MS结果显示,忍冬藤水提物冻干粉主要成分有咖啡酸、芦丁等.忍冬藤水提物冻干粉干预后,HE染色显示滑膜细胞数目减少,细胞形态发生不同程度改变,细胞呈圆形,胞质颜色深染,核区分相对明显.与模型组相比,RTCA检测忍冬藤水提物低剂量组48 h和忍冬藤水提物高剂量组24、48 h淋巴细胞迁移指数降低(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,流式细胞仪检测忍冬藤水提物低、高剂量组24、48 h CD3+CD4+T细胞百分比降低(P<0.01),忍冬藤水提物高剂量组48 h CD3+CD8+T细胞百分比降低(P<0.01).与模型组相比,ELISA检测共培养体系中忍冬藤水提物低、高剂量组24、48 h细胞因子sVCAM-1、sICAM-1浓度均降低(P<0.01).结论 忍冬藤水提冻物干粉能够降低sICAM-1、sVCAM-1含量,抑制淋巴细胞迁移至滑膜细胞,抑制CD4+T、CD8+T细胞的迁移浸润以减轻炎症反应,缓解滑膜细胞的炎性增殖,减缓和阻滞类风湿性关节炎的疾病发展过程,从而达到缓解炎症的目的.

关键词：忍冬藤水提物冻干粉、淋巴细胞、迁移、共培养体系、类风湿性关节炎

所属期刊栏目：46

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家中医临床研究基地业务建设科研专项No.JDZX2015191

在线出版日期：2023-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：232-241