脑泰方对血红蛋白诱导的大鼠皮质神经元损伤的保护作用及机制

摘要：

目的 探讨脑泰方对体外血红蛋白(Hb)诱导的大鼠皮质神经元损伤的保护作用及其机制.方法 原代培养新生SD大鼠皮质神经元,采用Hb诱导神经元模拟建立脑出血后神经元损伤细胞模型;实验设正常组、模型组、空白血清对照组、去铁胺组和10％脑泰方含药血清组.采用CCK8法检测各组细胞活力;采用Calcein-AM染色法检测各组细胞内铁含量;采用免疫荧光与高内涵细胞成像分析技术(HCA)检测各组神经元转铁蛋白(Tf)及其受体(TfR)、二价金属离子转运体(DMT-1)蛋白表达情况;采用酶联免疫吸附法检测各组上清液中脂质活性氧自由基(lipid-ROS)含量;采用real-time PCR法检测各组Tf、TfR和DMT-1 mRNA表达水平.结果 与正常组比较,模型组神经元细胞活力明显降低(P<0.01),细胞内铁含量、细胞上清液中lipid-ROS水平显著升高(P<0.01),Tf、TfR及DMT1蛋白及mRNA表达水平明显上调(P<0.01).与模型组比较,去铁胺组和10％脑泰方含药血清组细胞活力显著提高(P<0.01或P<0.05),细胞内铁含量、细胞上清液中lipid-ROS水平明显降低(P<0.01),Tf、TfR及DMT-1蛋白及其mRNA表达显著下调(P<0.01或P<0.05),去铁胺组和10％脑泰方含药血清组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 脑泰方可通过调节Hb诱导的大鼠皮质神经元细胞铁代谢,减轻神经元铁超载及lipid-ROS累积,从而提高神经元细胞活力;其作用与铁死亡抑制剂去铁胺一致,提示脑泰方可能通过抑制脑出血后神经元铁死亡而发挥神经保护作用.

关键词：脑泰方、脑出血、神经元、铁代谢、铁死亡、大鼠

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81774174、81774033;湖南省中医药科研项目201969;湖南中医药大学中西医结合一流学科开放基金项目2018ZXYJH15

在线出版日期：2019-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：825-832