右归饮对模拟人体内应力环境中成骨细胞碱性磷酸酶分泌的影响

摘要：

目的 探究牵张应力作用下右归饮含药血清刺激大鼠成骨细胞后,对其碱性磷酸酶(ALP)分泌的影响,评价右归饮在模拟人体内应力环境中促进成骨细胞增殖分化的作用.方法 随机将40只SD大鼠均分为右归饮组和生理盐水组,右归饮组每天按含生药量20 g/kg灌胃,生理盐水组灌以等量的生理盐水,连续灌胃1周;末次灌胃2h后,常规麻醉,心脏取血,分离提取血清,-20℃保存2组血清;采用序列酶消化法培养成骨细胞,传至第4代将细胞等量接种为6组,每组6孔,分别标记为无血清培养基对照组、生理盐水血清组、右归饮含药血清组、无血清12％牵张形变组、生理盐水血清12％牵张形变组和右归饮含药血清12％牵张形变组,无血清培养基同步化培养24 h;将右归饮含药血清及生理盐水血清分别作用于右归饮含药血清组、右归饮含药血清12％牵张形变组和生理盐水血清组、生理盐水血清12％牵张形变组细胞,同时采用0.5 Hz频率、12％形变量的牵张力对相应无血清组细胞、右归饮血清组细胞及生理盐水血清组细胞进行力学加载.分别于12 h和24h对各组细胞行ALP定量测定,检测各组细胞ALP活性;加力24 h后,行碱性磷酸酶染色(CAKP),显微镜镜检拍照,检测成骨细胞胞浆内CAKP颗粒数目及分布;并利用统计学软件对数据进行分析.结果 0.5 Hz、12％牵张应力条件下无血清组细胞与常规培养条件下无血清组细胞比较,前者ALP表达受抑制(P＜0.05);牵张应力条件下右归饮血清培养液与生理盐水血清培养液,较常规培养条件下2种血清培养液比较,均能刺激成骨细胞ALP表达(P＜0.05),且力学环境下右归饮组ALP值高于生理盐水血清组(P＜0.05).结论 无血清条件下,牵张应力表现出抑制成骨细胞ALP表达现象;右归饮在模拟人体牵张应力环境下能促进成骨细胞的增殖分化.

关键词：牵张应力、成骨细胞、碱性磷酸酶、右归饮、大鼠

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：浙江省中医药科学研究基金计划2010ZA020;浙江省自然科学基金项目Y2110928

在线出版日期：2013-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：542-545,549,后插2