融合蛋白人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在原核细胞中的表达
目的:构建人类磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican3, GPC3)重组原核表达载体。方法以人类肝脏cDNA文库为模板扩增出GPC3基因产物,与pMD-18 simple T 载体进行连接构建出T克隆载体;从T载体上获取基因片段,并对pET-32a(+)空载体进行双酶切,用T4连接酶连接,构建出pET-32a(+)-GPC3原核表达载体;对构建好的载体再次测序,并进行诱导表达。结果 PCR产物长度为837 bp,即扩增的GPC3 C末端长度,与NCBI网站的相比较,序列完全一致,说明pET-32a (+)载体中正确插入了目的片段,并且诱导表达出蛋白。结论成功构建了融合表达Pet-GPC3载体,蛋白诱导表达成功。
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3、基因表达、融合蛋白
R39;K71
北京市科学技术委员会“首都临床特色应用研究”专项Z131107002213071;首都医科大学基础-临床科研合作基金13JL14;佑安肝病艾滋病基金BJYAH-2011-002、BJYAH-2011-022
2014-07-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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