肺炎衣原体0308基因真核表达载体构建及表达检测

摘要：

目的 构建肺炎衣原体AR39株Cpn0308基因真核表达重组质粒,体外转染HeLa细胞并检测表达情况,为Cpn核酸疫苗的研制做准备.方法 应用PCR技术从CpnAR39株基因组中扩增Cpn0308全长基因,重组入pcDNA3.1/His A真核表达载体相应位点,进行酶切鉴定和序列分析后,运用脂质体介导重组质粒转染HeLa细胞,间接免疫荧光技术检测目的蛋白在真核细胞中表达情况.结果 PCR扩增得到393 bp的特异性Cpn0308基因,筛选鉴定出pcDNA3.1/His A-Cpn0308真核表达重组体,序列测定证实与GeneBank登录的CpnAR39株Cpn0308基因一致;间接免疫荧光法检测到重组质粒转染的HeLa细胞能够表达目的蛋白.结论 成功构建pcDNA3.1/HisA-Cpn0308真核表达重组体,且该重组体能够在体外真核细胞中表达目的蛋白,为进一步研究Cpn DNA疫苗以及研究该蛋白的生物学功能提供实验基础.

关键词：肺炎衣原体、真核表达、间接免疫荧光技术、DNA疫苗

所属期刊栏目：32

分类号：R73;R39

资助基金：河北省科技厅资助项目项目编号07276934

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：975-978