microRNA 在高磷诱导血管平滑肌细胞钙化早期的动态变化

摘要：

目的：观察高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化早期 microRNA 表达变化，分析其可能参与的信号通路途径。方法：采用高磷（无机磷2．6 mmol／L）刺激大鼠血管平滑肌细胞系 A7r5钙化7 d，邻甲酚酞络合酮比色法和考马斯亮蓝法检测细胞内钙含量，RT-PCR 法检测平滑肌细胞表型和钙化相关基因的表达变化，茜素红染色观察钙结节。microRNA microarray 法检测高磷刺激后0、3、12 h，680种 microRNA 表达变化。采用 TAM软件分析不同时间点间信号激活情况。结果：高磷诱导的 A7r5细胞钙盐含量升高9．6倍（P ＜0．05），平滑肌细胞表型 mRNA（SM-αactin， SM22）下调（P ＜0．05），钙化相关 mRNA（BMP2、MSX2、Runx2）上调（P ＜0．05），茜素红染色后可见高磷刺激组有明显钙结节。680种 microRNA 在3个时间点的表达各不相同，只有6种 microRNA 分别逐级上调或渐渐下调。26种信号通路被明显激活，其中包括细胞凋亡、分化增殖等已知与钙化相关的信号通路。结论：microRNA 参与调节血管钙化是一种动态微调的过程，为血管钙化研究带来新的思路。

关键词：血管钙化、肌、平滑、血管、微RNA、信号转导

所属期刊栏目：48

分类号：R331.3(人体生理学)

资助基金：国家基金委重大国际合作项目81220108004;国家重点基础研究发展计划973计划，2012CB518002;国家自然科学基金81070243、81121061、91339000;国家杰出青年基金81225002资助 Supported by the Foundation of Major International Cooperation81220108004;the National Basic Research Program of China973 Program，2012CB518002;the National Natural Science Foundation of China81070243，81121061，91339000;the National Science Fund for Distinguished Young Scholars81225002

在线出版日期：2016-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：756-765