用DAPI和Hoechst33342染色法检测DNA的流式细胞方法探讨

摘要：

目的:探索利用DAPI和Hoechst33342两种荧光染料检测DNA的流式细胞技术.方法:分别用DAPI、Hochest和PI 3种荧光染料标记HT-29细胞,通过流式细胞仪检测其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较3种方法测定结果.用标准荧光微球和DNA质量控制试剂盒做测试质控.结果:质控实验显示,紫外激光的变异系数(CV)为2.4;DAPI和Hoechst33342标记的小鸡红细胞核(chicken erythrocyte nuclei,CEN)出现4个峰,第2、第3和第4峰所在道数的平均值与第1峰的比值为2、3、4,且第1峰的CV均为2.4.DAPI、Hoechst33342标记小牛胸腺细胞核(calf thymocyte nuclei,CTN)出现2个峰,G2/G1为1.97,且GO/G1峰的CV为2.4.DAPI、Hoechst33342和PI 3种染料标记的HT-29细胞呈现完整的细胞周期峰,结果分别为CV值3.40、3.02和4.42,G0/G1期含量为60.86%、60.22%和60.81%,S期含量为28.85%、29.70%和29.82%,G2/M期含量为10.29%、9.09%和9.37%,3种标记法测定结果一致.结论:本文探索的DAPI和Hoechst33342标记法简单易行,可作为具备紫外激光器的流式细胞仪的首选DNA荧光染料.

关键词：染色与标记、流式细胞术、DNA、细胞周期

所属期刊栏目：42

分类号：R446-39(诊断学)

资助基金：激光显微切割仪与其他院内科研平台的联合应用09-07

在线出版日期：2010-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：480-484