食品中蜡样芽胞杆菌实时荧光RPA检测方法的建立与应用

摘要：

为实现简便快速地检测蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus),根据GenBank中蜡样芽胞杆菌16S RNA序列设计特异性引物和exo探针,建立了一种实时荧光重组酶聚合酶扩增方法,在39℃恒温下仅需20 min即可完成检测.该方法特异性扩增蜡样芽胞杆菌16S RNA基因片段,对其他芽胞杆菌和非芽胞杆菌无扩增;以蜡样芽胞杆菌基因组DNA作为模板,该方法的检测灵敏度为1.0×10-3 ng/μL,同已发表的real-time PCR方法一致.人工污染实验表明,当大米饭中蜡样芽胞杆菌污染量≥1.5×104 CFU/g时,即可通过real-time RPA方法检出,所需时间仅为6～13min;而当污染量≥1.5×105 CFU/g时,才能通过real-time PCR方法检出,所需时间至少为30 min(Ct值为20 ～31).

关键词：蜡样芽胞杆菌、等温扩增、实时荧光RPA、检测方法

所属期刊栏目：36

分类号：TS207.4;R155.5;Q93-3(食品工业)

资助基金：国家质量监督检验检疫总局科研项目2016IK107

在线出版日期：2018-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：89-94