甜瓜细菌性果斑病菌MH21中γ-谷氨酰转移酶AcGGT3的异源表达与功能分析

摘要：

[目的]为了探索γ-谷氨酰转移酶(Gamma-glutamyltransferase,GGT)在甜瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax citrulli)中的作用.[方法]以A.citrulli MH21菌株的DNA为模板,设计引物对Acggt3基因进行PCR扩增,克隆到蛋白表达载体pET22b(+)上,并进行测序和生物信息学分析.将重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3)中异源表达并纯化AcGGT3蛋白,用分光光度计法测定了不同温度和pH值条件下AcGGT3的酶活性.[结果]氨基酸序列分析结果显示,AcGGT3在Acidovorax属细菌中保守,并具有N末端信号肽.用IPTG诱导的方法成功表达并纯化出AeGGT3蛋白.酶活检测发现该蛋白在37℃时酶活性最高,最适pH为8.0.[结论]首次在A.citrulli菌株中克隆了γ-谷氨酰转移酶基因,并探索了AcGGT3蛋白的生物学特性,为下一步研究其致病功能莫定基础.

关键词：细菌性果斑病、西瓜食酸菌、γ-谷氨酰转移酶、异源表达、酶活性

所属期刊栏目：33

分类号：S436.631(病虫害及其防治)

资助基金：北京农学院青年科学基金QZK2015002;北京农学院高级别科研项目培育计划GJB2015001

在线出版日期：2018-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：27-31