桃果实PpARF1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

摘要：

[目的]为了探讨转录因子ARF1(Auxin Response Factor)对桃果实发育调控的机制.[方法]以‘24号’桃果实为试验材料,构建桃ARF1基因的原核表达载体pET32a-PpARF1,转化到BL21 (DE3)中诱导表达菌体蛋白,筛选出重组蛋白的最适表达条件,按照最适条件大量摇菌诱导表达蛋白,并进行重组蛋白的纯化,最后用纯化诱导后的重组蛋白制备多克隆抗体及WB检测.[结果]SDS-PAGE电泳检测得到pET32a-PpARF1重组蛋白的位置大约在95.0 kD,在37℃,转速250 r/min,IPTG 0.10 mmol/L,诱导4h,诱导出的蛋白表达量最大.免疫印迹试验显示所得抗血清能很好检测到目的蛋白.[结论]ARF转录因子参与生长素调控桃果实发育成熟的过程.

关键词：桃果实、ARF、原核表达、目的蛋白、western blot (WB)检测

所属期刊栏目：33

分类号：S662.1(果树园艺)

资助基金：2015年度新型生产经营主体科技能力提升工程项目20150203-01

在线出版日期：2018-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1-5