伪狂犬病病毒gE基因荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

伪狂犬病病毒(PRV)野毒有gE基因,而其疫苗毒株无gE基因,这为检测有无PRV野毒感染提供参考.用PCR方法扩增PRV的gE基因片段,构建含有PRV gE基因片段的重组质粒.以系列稀释后的重组质粒作为模板,应用SYBR Green I来进行检测PRV gE基因的实时荧光定量PCR扩增.结果显示:在(6.9×107～6.9×101) copies/μL范围内,相邻扩增曲线之间间距均匀,所有产物具有单一整齐的熔解曲线峰,标准曲线具有优良的线性关系.该方法最低可准确检测69 copies/μL的核酸模板,重复性试验的变异系数小于2％,对PRV-gE基因缺失疫苗毒株和常见猪源DNA病毒的检测结果均为阴性,对临床样品的检出率高于常规PCR方法.研究结果表明,建立了1种特异性强、灵敏度高、重复性好的检测PRV gE基因的SYBR Green I荧光定量PCR方法,可用于PRV野毒感染的定量检测.

关键词：伪狂犬病病毒、gE基因、荧光定量PCR、伪狂犬病病毒野毒

所属期刊栏目：30

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：天津市宁河原种猪场科技计划项目2011

在线出版日期：2015-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：74-77