10.3969/j.issn.1002-3186.2008.04.010
猪IL-18 mRNA定量RT-PCR检测方法的建立
根据GenBank中猪白介素(IL)-18基因序列,设计1对引物,用RT-PCR技术从猪肺泡巨噬细胞总RNA中扩增出其411 bp eDNA片段,将其与pGEM-T Easy载体连接,经转化、筛选阳性克隆、酶切与测序鉴定后,构建出含猪IL-18 cDNA部分片段的重组质粒.后用反向PCR技术构建出与扩增411 bp片段共用同1对引物,但缺失174 bp的竞争重组质粒.通过上述2种质粒的竞争PCR方法,建立了猪IL-18 mRNA的标准竞争曲线,得到其直线回归方程y=0.583 2 x-2.903 4(R2=0.9898).
猪、IL-18、竞争定量PCR
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S852.4(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金资助项目30600442;北京市自然科学基金资助项目6082008;北京市属市管高校人才强教计划项目2007
2009-03-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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