猪嗜中性粒细胞cAMP磷酸二酯酶的提取与活性检测

摘要：

目的:提取动物体的cAMP磷酸二酯酶(PDE),并检测其活性,为兽医临床研究PDE活性的生理病理变化和中西药物对PDE活性调节作用建立实验方法.方法:猪血经过葡聚糖沉降,淋巴细胞分离液分离,特殊分离液洗涤和红细胞溶胀后,获得嗜中性白细胞.嗜中性白细胞破碎后释放PDE,通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定反应体系中cAMP的含量,根据底物(cAMP)的减少量,确定嗜中性白细胞中PDE活性.结果:经显微镜计数嗜中性粒细胞纯度达95%;酶量在10～40 μl间对cAMP的分解率为9.90%～31.39%,与PDE活性之间存在直线相关关系(r=0.99).结论:猪嗜中性粒细胞中含有高纯度、高活性的cAMP-PDE;高效液相色谱法可以准确测定PDE反应前后cAMP含量的变化;两种方法结合可以作为兽医临床研究机体PDE活性变化和中西药物对PDE活性调节作用的新方法.

关键词：cAMP、磷酸二酯酶、猪、嗜中性粒细胞

所属期刊栏目：18

分类号：S852.33(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金30270978;北京市科技新星计划项目9558100500;北京市教委资助项目;北京市重点实验室基金

在线出版日期：2004-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：241-244