10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2023.06.026
响应面法遴选外周血淋巴细胞染色体G显带制备条件与效果
目的 寻找人外周血淋巴细胞染色体 G显带的最佳制备条件.方法 通过文献检索和实验室既往经验找出 5 个影响染色体 G显带的关键因素,即秋水仙素浓度、低渗时间、滴片湿度、烤片时间及胰酶浓度,采用响应面法遴选 5 个关键因素的最优配伍条件.以各组测量条件下获得的相同标本的制备成功率、独立核型染色体的分散面积、染色体条带分辨率及交叉个数对比分析方法评价染色体 G显带效果.结果 以响应面法设计的 41 组试验条件培养成功率均为 100%.综合分析独立核型染色体的分散面积、染色体条带分辨率及交叉个数 3 个指标,最优制备条件为秋水仙终浓度 0.15μg/mL、低渗时间 40min、滴片湿度 55%、80℃烤片 3h 及胰酶浓度 0.05%.该条件下获得的染色体分散面积为 289 236±78 448(像素);染色体>550 带占比为 15%,400~550 带占比为 75%,320~400 带占比为 10%;交叉个数 0 占比为 61%,交叉个数 1~3 占比为 36%,交叉个数>3 占比为 3%.结论 采用响应面法遴选人外周血淋巴细胞染色体G显带制备方法测量条件可保证染色体 G显带制备成功率 100%,染色体分散面积为 289236±78448(像素),获得 550 条带以上染色体占比达15%、400 条带以上染色体占比达 90%,1~3 以下交叉个数占比达 97%.满足人外周血淋巴细胞染色体 G显带制备的临床需求.
响应面法、外周血淋巴细胞、染色体制备、G显带
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R-331(医学研究方法)
北京航天总医院创新基金项目2020-610
2023-09-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1040-1046