维生素D通过下调谷氨酰胺合成酶抑制乳腺癌细胞增殖

摘要：

目的 探究维生素D对非三阴性乳腺癌(non-triple negative breast cancer,Non-TNBC)和TNBC癌细胞增殖的影响及分子机制.方法 收集TNBC和Non-TNBC患者乳腺组织,原代培养TNBC和Non-TNBC患者乳腺细胞;免疫荧光检测乳腺细胞雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和HER2蛋白表达;免疫荧光检测Non-TNBC和TNBC乳腺癌组织和乳腺细胞中VDR蛋白表达;CCK-8检测细胞活力变化;流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期的变化;光学比色法检测细胞谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)活力的变化;ELISA检测细胞培养上清和胞内谷氨酰胺的水平;Western blot检测细胞GS和VDR蛋白表达的变化;CHIP-PCR检测VDR对GS的转录调控.结果 TNBC患者外周血中维生素D水平和癌组织VDR蛋白表达明显低于Non-TNBC患者(P<0.05).相比于原代Non-TNBC乳腺癌细胞,原代TNBC患者乳腺癌细胞低表达雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和HER2蛋白表达;TNBC乳腺癌细胞VDR表达水平明显低于Non-TNBC乳腺癌细胞(P<0.05);VD(10-7～10-4 mol/L)可明显剂量依赖性的抑制Non-TNBC乳腺癌细胞和TNBC乳腺癌细胞细胞活力(P<0.05).相比于0mol/L VD组,103 mol/L的VD组Non-TNBC乳腺癌细胞和TNBC乳腺癌细胞细胞增殖比例明显减少(P<0.05);相比于0mol/L VD组,103 mol/L的VD组Non-TNBC乳腺癌细胞G1/G0期细胞比例明显减少(P<0.05);103 mol/L的VD组TNBC乳腺癌细胞G1/G0期细胞比例明显减少,S期细胞比例明显增加(P<0.05);相比于0mol/L VD组,103 mol/L的VD组Non-TNBC和TNBC乳腺癌细胞谷氨酰胺合成酶活力、谷氨酰胺合成酶蛋白、细胞内和细胞外谷氨酰胺水平表达比例明显减少(P<0.05);相比于0mol/L VD组,103 mol/L的VD组Non-TNBC乳腺癌细胞和TNBC乳腺癌细胞VDR蛋白表达明显增加(P<0.05);103 mol/L的VD组TNBC乳腺癌细胞VDR可转录调控GS基因转录(P<0.05).结论 维生素D通过下调谷氨酰胺合成酶抑制乳腺癌细胞增殖.

关键词：维生素D;三阴性乳腺癌;维生素受体;谷氨酰胺合成酶;细胞增殖

所属期刊栏目：29

分类号：Q565;R737.9(维生素)

资助基金：国家自然科学基金;东莞市科技发展重点项目

在线出版日期：2022-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：145-152