微小RNA-21、紧密连接蛋白occludin和ROCK1与幼鼠肠屏障功能障碍的关系

摘要：

目的 研究微小RNA-21、紧密连接蛋白occludin和ROCK1与幼鼠肠屏障功能障碍的关系.方法 将36只4周龄小鼠随机分为2组:假手术组、肠屏障功能障碍组.通过苏木精和伊红染色观察肠系膜病理学变化;通过Chiu病理评分评估肠系膜切片的组织学改变程度;通过双荧光素酶报告系统测量ROCK1荧光素酶活性;通过RT-qPCR和蛋白质免疫印迹检测miRNA-21、ROCK1和occludin mRNA和蛋白表达量;通过ELISA试剂盒检测炎症因子(TNF-α、IL-6)、iFABP和MPO水平.结果 在假手术组中,在肠黏膜中仅观察到少量淋巴细胞浸润,肠黏膜正常,厚度均匀,绒毛排列整齐,上皮完整.在肠屏障功能障碍组中,观察到肠绒毛上皮和椎板分离,肠绒毛破裂,出血和溃疡,固有层中有炎性细胞,黏膜层坏死.与假手术组相比,肠屏障功能障碍组Chiu病理评分升高(P＜0.05);miRNA-21与ROCK1的3'UTR直接相互作用,ROCK1突变体组(0.98 ±0.20)3'UTR转染的细胞中ROCK1的荧光活性与ROCK1野生型组相比升高(P＜0.05);与假手术组相比,肠屏障功能障碍组miRNA-21 mRNA表达量增加,而ROCK1和occludin mRNA和蛋白表达量均降低(P＜0.05);肠屏障功能障碍组TNF-α、IL-6、iFABP和MPO水平高于假手术组(P＜0.05).结论 缺血改变了模型中miRNA-21和ROCK1的表达,miRNA-21通过靶向ROCK1的3'UTR影响occludin表达,影响肠道细胞旁通透性.

关键词：肠屏障功能障碍、紧密连接蛋白、微小RNA-21、缺血再灌注、荧光素酶活性

所属期刊栏目：26

分类号：R57;R73

在线出版日期：2020-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1940-1944,1971