FOXO1质粒稳定转染人骨肉瘤细胞的筛选及意义

摘要：

目的 建立稳定表达FOXO1-GFP的人骨肉瘤U2OS细胞系,并验证U2OS-FOXO1-GFP细胞模型对氧化应激损伤的指示作用.方法 将pcDNA3-GFP-FOXO1质粒转染到U2OS细胞中,利用G418和FCM筛选稳定细胞系.40mmol/LAAPH处理U2OS-FOXO1-GFP细胞4h,CCK-8检测细胞活力,荧光显微镜观察FOXO1-GFP的分布情况.结果 成功获得U2OS-FOXO1-GFP稳转细胞系.经G418和FCM筛选后,FOXO1-GFP阳性细胞占细胞总数的92％.CCK-8结果显示,AAPH处理后,U2OS-FOXO1-GFP细胞存活率下降至0.55 ±0.04明显低于对照组(P＜0.05).荧光显微镜观察发现,正常情况下,FOXO1-GFP位于细胞质;AAPH处理后,FOXO1-GFP易位到细胞核.结论 U2OS-FOXO1-GFP细胞系能很好的指示细胞氧化应激损伤,为筛选抗氧化应激药物提供了一种有利工具.

关键词：人骨肉瘤细胞系、FOXO1、氧化应激、AAPH

所属期刊栏目：22

资助基金：国家自然科学基金81341123

在线出版日期：2015-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：322-325