长引物快速PCR结合核酸试纸条法可视化检测四种病原体

摘要：

目的 建立一种基于病原体核酸分子的血液安全性检定方法,可视化区分血液中乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)、艾滋病毒(HIV)和梅毒螺旋体(TP).方法 利用长引物PCR扩增四种病原体核酸,循环步骤由传统的三步简化为两步.将修饰有小分子抗原的扩增产物点样于固定有相应抗体的纳米颗粒试纸条上,肉眼判读显色结果.优化了长引物PCR对于四种病原体扩增的退火和变性温度,并评价了该方法用于病原体阳参及血清样本的检测准确性.结果 四种病原体核酸扩增的退火温度分别为76℃、78℃、76℃和78℃;变性温度为84℃、90℃、84℃和88℃;本方法能成功区分四种病原体的阴阳性样本,准确性高;扩增时间仅为40 min/40个循环,检测为10 min.结论 该方法能够用于四种病原体核酸的可视化检测,与传统的检测方法相比,检测速度快,成本低,无需昂贵的仪器,易于广大基层医院普及.

关键词：长引物聚合酶链反应、核酸试纸条法、病原体核酸

所属期刊栏目：20

分类号：R446.5(诊断学)

资助基金：国家自然科学基金项目编号 21275161,21305069;江苏省妇幼保健院青年人才培养项目编号 FRC201302;江苏省妇幼保健重点学科科研项目编号 FXK201217

在线出版日期：2014-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：436-439