Tamm-Horsfall蛋白片段的基因克隆、表达、纯化及抗原性鉴定

摘要：

目的 克隆并表达尿调节素(Tamm-Horsfall,THP)蛋白片段的基因,检测其抗原性.方法 利用RT-PCR技术扩增THP蛋白片段基因,测序后将目的基因克隆入原核表达质粒pET28a载体,转化至大场杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,获得重组THP蛋白片段.经NI亲和层析柱纯化,用western-blot检测重组蛋白与THP单克隆抗体结合活性.结果 克隆THP蛋白片段基因,其开放阅读框为195 bp编码65个氨基酸.表达的重组THP蛋白片段以包涵体形式存在,菌体蛋白纯化后,经western-blot检测具有较好的抗原性.结论 成功地克隆和表达了THP片段的基因,为抗THP单克隆抗体制备和THP检测试剂盒的研发奠定了基础.

关键词：Tamm-Horsfall蛋白、基因克隆、表达、抗原性

所属期刊栏目：19

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：首都医学发展基金2009-2056

在线出版日期：2013-01-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：360-363