10.3321/j.issn:0479-8023.2000.02.010
GHRP-scu-PA-32K突变体的构建、表达及纯化产物的部分性质研究
在scu-PA-32K的cDNA分子基础上经定点突变,在N端紧接Leu1之前引入编码GHRP四肽的寡核苷酸序列(GGTCATAGGCCT),构建了GHRP-scu-PA-32K的突变体cDNA.将它克隆到表达载体pCM-βneo中,与pCMβ-dhfr共转染CHO/DHFR-细胞.筛选到的稳定表达株在无血清培养基的表达量为580IU/(106细胞.24h).经锌离子螯合亲和柱纯化的产物,SDS-PAGE显示为单一蛋白条带,分子量为33kD,质谱法测定分子量也为33kD.经血纤维蛋白平板法测定比活为150000IU/mg蛋白.对血纤维蛋白的亲和性,突变体为scu-PA-32K的4.5倍.
单链尿激酶型纤溶酶原激活剂、GHRP四肽、CHO细胞、定点突变
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Q71(生物大分子的结构和功能)
国家高技术研究发展计划863计划863-103-21-02
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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