10.11713/j.issn.1009-4822.2015.03.007
人骨肉瘤细胞适配体的早期筛选
目的 体外随机合成单链寡核苷酸备选文库,以骨肉瘤U-2 OS完整细胞作为靶点,筛选出与其结合的高特异性、高亲和性单链DNA( ssDNA) .方法 将体外合成随机碱基序列的单链DNA 文库与人骨肉瘤U-2 OS细胞相结合,收获与靶细胞结合的单链DNA,通过优化PCR条件进行大量扩增后,应用生物素-链霉亲和素亲和层析柱分离出正链DNA.结果 以10,14以及18个循环时扩增dsDNA产物最理想;应用生物素-链霉亲和素磁珠分离法制备的正链ssDNA纯度高,可有效保证次级文库的筛选.结论 应用Cell-SELEX技术可成功筛选早期ssDNA文库,为后续获得针对人骨肉瘤U-2 OS细胞的高特异性适配体奠定实验基础.
人骨肉瘤、Cell-SELEX技术、适配体
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R738.1(肿瘤学)
吉林省教育厅科学技术研究项目2011132
2015-08-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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