肝豆汤改良方对TX小鼠脑组织XIAP、Caspase-9和Caspase-3蛋白及其mRNA表达的影响

摘要：

目的 探究肝豆汤改良方抑制肝豆状核变性(Wilson's disease,WD)脑神经细胞凋亡的分子机制.方法 选取1月龄TX小鼠120只,随机分为TX模型组(40只)、肝豆汤改良方组(40只)、丁苯酞组(20只),另选DL小鼠40只作为正常组;每组再分成2组,各20只,分别予以生理盐水、肝豆汤改良方、丁苯酞灌胃2个月和4个月.分别采用免疫组织化学法和Western blot法检测小鼠脑组织中X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis,XIAP)、胱冬肽酶-9(Caspase-9)及胱冬肽酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平,采用RT-PCR技术检测小鼠脑组织中XIAP、Caspase-9及Caspase-3 mRNA表达水平.结果 免疫组织化学检测显示,肝豆汤改良方组XIAP表达水平较同月龄模型组明显增多,Caspase-9和Caspase-3表达水平较同月龄模型组下降,5月龄和3月龄肝豆汤改良方组XIAP和Caspase-3表达水平有所差异.Western blot检测结果显示,月龄因素对脑组织XIAP、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达水平的主效应均无统计学意义(P＞0.05);月龄因素和分组因素对3种蛋白表达水平的交互作用均无统计学意义(P＞0.05);对于同月龄小鼠,模型组脑组织XIAP表达水平显著低于正常组(P＜0.05),Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平显著高于正常组(P＜0.05);肝豆汤改良方组XIAP表达水平显著高于模型组(P＜0.05),Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平显著低于模型组(P＜0.05).RT-PCR检测结果显示,月龄因素对小鼠脑组织XIAP mRNA表达水平的主效应无统计学意义(P＞0.05),但对Caspase-9、Caspase-3 mRNA表达水平的主效应具有统计学意义(P＜0.05);月龄因素和分组因素对XIAP、Caspase-9、Caspase-3 mRNA表达水平的交互作用均无统计学意义(P＞0.05).对于相同月龄小鼠,模型组脑组织XIAP mRNA表达水平显著低于正常组(P＜0.05),而Caspase-9、Caspase-3 mRNA表达水平显著高于正常组(P＜0.05);与模型组比较,丁苯酞组和肝豆汤改良方组XIAP mRNA表达水平显著升高(P＜0.05),Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达水平显著降低(P＜0.05).结论 肝豆汤改良方通过上调XIAP蛋白及其mRNA的表达,下调Caspase-9、Caspase-3蛋白及其mRNA在脑组织中的表达,减轻铜沉积对神经细胞的氧化应激损伤,从而抑制神经细胞的凋亡.

关键词：肝豆状核变性、肝豆汤改良方、TX小鼠、神经细胞损伤、细胞凋亡

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分类号：R285.5;R742.4(中药学)

资助基金：国家自然科学基金项目81173212

在线出版日期：2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：58-64