10.3969/j.issn.1009-6469.2023.11.006
乳酸诱导巨噬细胞M2型极化对黑色素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响
目的 探究乳酸(LA)是否可通过调控巨噬细胞M2型极化影响黑色素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭.方法 2021年1月至2022年2月采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测乳酸对细胞的毒性;使用乳酸干预巨噬细胞后的细胞上清液培养黑色素瘤细胞,经CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡;经划痕愈合实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭.通过光学显微镜对乳酸干预后的巨噬细胞的形态进行观察,并通过ELISA检测巨噬细胞极化相关因子的表达情况.实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测乳酸对巨噬细胞中肿瘤蛋白翻译调节因子1(Tpt1)、肺腺癌转移相关转录本1(Malat1)表达的影响.结果 乳酸对巨噬细胞Raw264.7和黑色素瘤细胞B16F10均无明显毒性(P>0.05).5、10、20 mmol/L乳酸干预Raw264.7细胞后的上清液后,B16F10细胞活力[(125.36±7.88)%、(144.36±8.65)%、(167.28±10.12)%比(100.00±0.00)%]、划痕愈合率[(39.21±3.15)%、(52.65±3.87)%、(64.24±6.12)%比(25.26±2.23)%]、侵袭细胞数[(89.36±8.12)个、(113.05±10.03)个、(131.25±11.14)个比(45.36±4.21)个]增高,凋亡率[(41.23±4.02)%、(29.26±3.14)%、(18.64±2.09)%比(57.26±4.25)%]下降(P<0.05).5、10、20 mmol/L乳酸作用Raw264.7细胞后,细胞形态出现M2型形态变化,M1型相关分子表达差异无统计学意义(P>0.05),M2型相关因子血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-10(IL-10)[(47.26±4.02)ng/L、(65.32±5.48)ng/L、(79.36±7.12)ng/L比(27.25±2.21)ng/L]、CD163表达均显著增多(P<0.05).乳酸对Raw264.7细胞中Tpt1、Malat1表达具有明显的促进作用(P<0.05).结论 乳酸诱导巨噬细胞M2型极化促进黑色素瘤恶性生物学发展,且Tpt1、Malat1表达可能参与此过程.
乳酸、巨噬细胞M2型极化、黑色素瘤、增殖、凋亡、迁移、侵袭
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R735.7;R318;R512.5
国家自然科学基金31960206
2023-11-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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