微RNA-106b-5p通过靶向α-烯醇化酶调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、炎症的研究

摘要：

目的 观察微RNA-106b-5p、α-烯醇化酶(ENO1)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(MH7A)增殖、炎症的影响,并探究二者之间的联系.方法 2018年1月至2021年12月长安医院接诊手术的8例RA病人获得了滑膜组织,4例意外事故引起关节损伤的无RA、骨关节炎史健康病人作为对照.运用RT-qPCR实验检测RA滑膜、正常滑膜及对照组(正常MH7A)、白细胞介素(IL)-1β组细胞(10μg/L IL-1β处理)中miR-106b-5p、ENO1的表达;脂质体法将mimic-NC组(转染mimic)、miR-106b-5p mimic组(转染miR-106b-5p mimic)、inhibitor-NC组(转染inhibitor)、miR-106b-5p inhibitor组(转染miR-106b-5p inhibitor)、pcD-NA组(转染pcDNA)、pcDNA-ENO1组(转染pcDNA-ENO1)、si-NC组(转染si-NC)、si-ENO1组(转染si-ENO1)、miR-106b-5p mimic+pcDNA组(共转染miR-106b-5p mimic+pcDNA)、miR-106b-5p mimic+pcDNA-ENO1组(共转染miR-106b-5p mimic+pcD-NA-ENO1)、miR-106b-5p inhibitor+si-NC组(共转染miR-106b-5p inhibitor+si-NC)、miR-106b-5p inhibitor+si-ENO1组(共转染miR-106b-5p inhibitor+si-ENO1)转染至MH7A,再IL-1β处理.细胞计数试剂盒(CCK8)检测细胞活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞IL-6、IL-8、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的含量.双萤光素酶报告基因实验检测细胞荧光活性;蛋白质印迹法实验检测细胞ENO1蛋白.结果 与对照组(0.52±0.05、147.32±12.54、0.45±0.03、1.55±0.12)相比,IL-1β组细胞活性(1.13±0.06)、IL-6(433.21±37.84)、IL-8(1.38±0.10)、MMP-3(2.78±0.22)均升高(P<0.05).与mimic-NC组(1.12±0.06、435.15±39.67、1.39±0.12、2.77±0.25)相比,miR-106b-5p mimic组细胞活性(1.98±0.11)、IL-6(164.12±15.74)、IL-8(0.65±0.05)、MMP-3(1.94±0.17)均降低(P<0.05),且抑制miR-106b-5p具有相反的作用.双萤光素酶报告实验显示,miR-106b-5p靶向负调控ENO1,且二者在RA组织中的表达呈负相关.与pcDNA组(1.14±0.06、434.93±37.89、1.37±0.11、2.79±0.22)相比,pcDNA-ENO1组细胞活性(1.96±0.08)、IL-6(867.83±71.84)、IL-8(2.83±0.23)、MMP-3(4.93±0.34)升高(P<0.05);与si-NC组相比,si-ENO1组细胞活性、IL-6、IL-8、MMP-3降低(P<0.05).过表达ENO1减弱miR-106b-5p对IL-1β处理细胞增殖、炎性因子的促进作用,敲减ENO1减弱抑制miR-106b-5p对IL-1β处理细胞增殖、炎性因子的抑制作用.结论 miR-106b-5p能够抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的增殖和炎症反应,产生这种调控作用的潜在机制与靶向ENO1有关.

关键词：关节炎、类风湿、微RNA-106b-5p、α-烯醇化酶、滑膜、成纤维细胞、增殖、炎症

所属期刊栏目：27

分类号：R619.6;R779.6;R363

资助基金：陕西省医学科学研究课题2018JM1255

在线出版日期：2023-09-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2045-2050