黑色素瘤细胞外泌体通过Prospero同源异形盒蛋白1调控肿瘤淋巴转移机制的研究

摘要：

目的 探讨黑色素瘤外泌体(melanoma exosomes,MM-ex)携带的果蝇Prospero同源异形盒蛋白1(prospero homeobox protein 1,Prox-1),在调控淋巴管内皮细胞(lymphatic endothelial cells,LECs)增殖、迁移以及生成具有转移肿瘤细胞功能淋巴管过程中的作用.方法 采用慢病毒转染实验构建低表达Prox-1黑色素瘤细胞株(MMshProx-1).采用试剂盒法获取MM和MM-ex-shProx-1的外泌体(MM-ex和MM-exshProx-1).采用免疫荧光检测、蛋白质印迹法检测、细胞增殖及细胞迁移实验,观察MM-ex及MM-exshProx-1对LECs生物学特性的影响.采用免疫组化(IHC)法检测2015年9月至2021年4月江苏大学附属医院收治的32例皮肤黑色素瘤病理标本中Prox-1及淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(lymphatic vessel endothelial hyaluronic acid receptor-1,LYVE-1)的表达情况,统计微淋巴管密度(microlymphatic vessel density,MLVD),并分析Prox-1及MLVD与黑色素瘤生物学特性的相关性.结果 细胞实验:MM-ex促进淋巴管内皮细胞增殖及迁移,促进了淋巴管的成形.MM-exshProx-1对LECs无增殖及迁移的影响,对淋巴管成形无促进作用.临床研究:免疫组化的结果表明Prox-1、LYVE-1在黑色素瘤组织及肿瘤周围组织中的阳性表达率显著高于正常皮肤组织.Prox-1信号在黑色素瘤淋巴结转移组和Ⅲ期及Ⅳ期肿瘤组的表达率[87.50％(14/16)、79.17％(19/24)]明显高于无淋巴结转移组和Ⅰ期及Ⅱ期肿瘤组[37.50％(6/16)、12.50％(1/8)](均P＜0.05).LYVE-1在黑色素瘤转移组和Ⅲ期及Ⅳ期肿瘤组的表达(9.30±4.65、5.15±1.72)明显高于无淋巴结转移组和Ⅰ期及Ⅱ期肿瘤组(5.66±1.69、5.30±1.65,均P＜0.05).Prox-1、LYVE-1的表达情况均与病人的年龄、性别无关(均P＞0.05).结论 MM-ex通过Prox-1促进LECs的增殖及迁移,在肿瘤淋巴管再生中起到重要作用.Prox-1、LYVE-1及MLVD与黑色素瘤淋巴转移及预后呈明显相关性,为皮肤黑色素瘤的早期淋巴转移及预后提供一个新的判断指标,也为皮肤黑色素瘤的临床治疗提供新的方法和策略.

关键词：黑色素瘤、外泌体、Prospero同源异形盒蛋白1、微淋巴管密度、淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1、淋巴转移

所属期刊栏目：27

分类号：R735.7;Q26;R394.2

资助基金：国家自然科学基金;江苏省卫生厅江苏省青年医学人才项目;江苏大学附属医院博士人才启动基金项目

在线出版日期：2023-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1331-1337,后插2