调节性核糖核酸酶1对高糖诱导的视网膜神经节细胞损伤的保护作用

摘要：

目的 探讨调节性核糖核酸酶1(Reg1)对高糖诱导的视网膜神经节细胞损伤的保护作用及机制.方法 2018年8月至2020年2月构建高糖诱导的RGC-5视网膜神经节细胞损伤模型,实验分为四组:Con组(正常糖+未转染的RGC-5细胞)、HG组(高糖+未转染的RGC-5细胞)、pcDNA3-Reg1组(高糖+转染Reg1过表达质粒的RGC-5细胞)、pcDNA3-NC组(高糖+转染对照质粒的RGC-5细胞).实时荧光定量聚合酶链式反应检测Reg1、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-12、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达;蛋白质免疫印迹检测Reg1、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、磷酸化p65(p-p65)、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)的表达;免疫荧光染色检测Reg1、p-p65的表达;TUNEL染色检测凋亡水平;酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中各炎性因子的含量.结果 Con组中Reg1的相对荧光强度、mRNA相对表达量、蛋白质相对表达量分别为1.00±0.21、1.00±0.15、1.00±0.18,HG组Reg1的相对荧光强度、mRNA相对表达量、蛋白质相对表达量分别为2.49±0.36、3.86±0.42、3.17±0.39,pcDNA3-Reg1组Reg1的相对荧光强度、mRNA相对表达量、蛋白质相对表达量分别为6.77±0.72、8.18±0.67、6.30±0.51,pcDNA3-NC组Reg1的相对荧光强度、mRNA相对表达量、蛋白质相对表达量分别为2.75±0.40、3.59±0.38、2.85±0.34,HG组、pcDNA3-NC组Reg1相对荧光强度、mRNA和蛋白质相对表达量高于Con组,且低于pcDNA3-Reg1组(P<0.05).Con组TUNEL+细胞比例、Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3分别为(1.73±0.22)％、1.00±0.28、1.00±0.20、1.00±0.17,HG组TUNEL+细胞比例、Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3分别为(14.79±0.83)％、0.29±0.11、5.25±0.66、4.93±0.52,pcDNA3-Reg1组TUNEL+细胞比例、Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3分别为(3.77±0.34)％、0.58±0.43、2.51±0.45、2.58±0.33,pcDNA3-NC组TUNEL+细胞比例、Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3分别为(14.55±0.90)％、0.21±0.14、5.14±0.59、4.77±0.46,Con组、pcDNA3-Reg1组TUNEL+细胞比例、Bax、cleaved caspase-3蛋白质相对表达量低于HG组、pcDNA3-NC组,而Bcl-2蛋白质相对表达量高于HG组、pcDNA3-NC组(P<0.05).Con组、pcDNA3-Reg1组细胞IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-αmRNA相对表达量,及上清液蛋白质含量低于HG组、pcDNA3-NC组(P<0.05).Con组、pcDNA3-Reg1组p-p65相对荧光强度,及p-p65、p-IκBα蛋白质相对表达量低于HG组、pcDNA3-NC组(P<0.05).结论 高糖状态下RGC-5视网膜神经节细胞高表达Reg1,上调Reg1表达可以降低细胞凋亡及炎症,可能与抑制NFκB信号通路活化有关.

关键词：高血糖症、调节性核糖核酸酶1、糖尿病视网膜病变、炎症、视网膜神经节细胞、核因子κB、细胞凋亡

所属期刊栏目：27

分类号：R735.1;R329.26;S829.1

在线出版日期：2023-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：754-759