10.3969/j.issn.1009-6469.2022.10.029
微小RNA-525-5p通过靶向RECQ样蛋白5调控乳腺癌放射敏感性
目的 探讨微小RNA-525-5p(miR-525-5p)对乳腺癌细胞辐射照射敏感性的影响及机制.方法 该研究起止时间为2019年6月至2020年6月,人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7、BT474、非恶性乳腺上皮细胞MCF-10A均购自美国菌种保藏中心.运用qRT-PCR法检测人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7、BT474、非恶性乳腺上皮细胞MCF-10A中miR-525-5p的mRNA的表达;将miR-525-5p模拟物(miR-525-5p mimics)阴性对照(miR-NC)组(转染miR-NC)、miR-525-5p组(转染miR-525-5p mim-ics)、RECQL5小干扰RNA阴性对照(si-NC)组(转染si-NC)、RECQL5小干扰RNA(si-RECQL5)组(转染si-RECQL5)、miR-525-5p+RECQL5过表达空载体(pcDNA)组(共转染miR-525-5p mimics和pcDNA)、miR-525-5p+RECQL5过表达载体(pcDNA-REC-QL5)组(共转染miR-525-5p mimics和pcDNA-RECQL5),均用脂质体法转染至MDA-MB-231细胞;Western blotting检测细胞中RECQ样蛋白5(RECQL5)的蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性;克隆形成实验检测细胞的存活分数.结果 与非恶性乳腺上皮细胞MCF-10A相比,人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7、BT474中miR-525-5p表达[0.28±0.02,0.33±0.02,0.42±0.03比1.01±0.08]显著降低,RECQL5 mRNA和蛋白表达[1.68±0.15,1.58±0.12,1.48±0.11比1.00±0.08;1.43±0.11,1.38±0.12,1.53±0.14比0.99±0.07]显著升高(P<0.05).过表达miR-525-5p或敲减RECQL5均可促进乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡,增强对辐射照射的敏感性.miR-525-5p可抑制野生型RECQL5细胞的荧光活性,并负向调控RECQL5的表达.过表达RECQL5可逆转miR-525-5p对乳腺癌细胞的凋亡促进及辐照增敏作用.结论 miR-525-5p可促进乳腺癌细胞凋亡,增强对辐射照射的敏感性,其机制与靶向RECQL5有关,将可为乳腺癌的放射治疗提供新方向.
乳腺肿瘤、RecQ解旋酶类、微小RNA-525-5p、放射敏感性
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R730.55;R318;S823
2022-09-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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2032-2037,后插3