miR-218-5p靶向B细胞淋巴瘤因子3表达影响白血病K562细胞的增殖和凋亡

摘要：

目的 探讨微小RNA-218-5p(miR-218-5p)靶向B细胞淋巴瘤因子3(BCL3)基因对白血病细胞增殖和凋亡的影响.方法 反转录及荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测正常人骨髓细胞和白血病骨髓细胞中miR-218-5p和BCL3的表达水平.以白血病细胞K562为研究对象,分别构建过表达miR-218-5p或沉默BCL3的K562细胞株,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞增殖抗原(Ki67)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved Caspase-3)的表达水平.双荧光素酶报告基因实验和Western blotting验证miR-218-5p和BCL3的靶向调控关系.结果 与正常人骨髓细胞相比,白血病骨髓细胞中miR-218-5p的表达水平(1.00±0.13)比(0.44±0.18)显著降低,BCL3的表达水平(1.04±0.32)比(4.76±1.38)、(0.26±0.05)比(0.78±0.13)显著升高.过表达miR-218-5p或沉默BCL3均可显著抑制K562细胞Cyclin D1(0.69±0.08)比(0.34±0.05)、(0.65±0.07)比(0.18±0.04)和Ki67表达(0.68±0.07)比(0.23±0.04)、(0.54±0.06)比(0.24±0.04),促进Cleaved-Caspase-3表达(0.38±0.04)比(0.89±0.11)、(0.17±0.04)比(0.56±0.07),抑制细胞增殖[(98.72±12.38)％比(69.79±7.62)％]、[(97.48±11.49)％比(65.73±6.86)％],促进细胞凋亡[(7.26±0.85)％比(24.46±2.67)％]、[(6.63±0.85)％比(26.46±2.81)％].BCL3是miR-218-5p的靶基因,miR-218-5p可负性调控BCL3的表达.过表达BCL3可部分逆转miR-218-5p对K562细胞增殖和凋亡的影响.结论 miR-218-5p通过靶向BCL3抑制白血病细胞增殖,促进细胞凋亡.

关键词：白血病、微小RNA-218-5p、B细胞淋巴瘤因子3、细胞增殖、凋亡

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在线出版日期：2022-04-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：660-665