10.3969/j.issn.1009-6469.2022.02.016
微小RNA-766-5p通过调控组氨酸磷酸酶基因表达影响胃癌细胞增殖和放射敏感性
目的 研究微小RNA(miR)-766-5p对人胃腺癌细胞(AGS)细胞增殖和放射敏感性的影响及潜在作用机制.方法 以胃上皮细胞GES-1为对照,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞系AGS、MGC803、MKN-28和SGC-7901中组氨酸磷酸酶(LHPP)mRNA和miR-766-5p的表达,AGS细胞转染anti-miR-766-5p,确定抑制miR-766-5p表达对细胞的影响,克隆形成实验检测不同放射剂量处理后细胞存活分数,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定AGS细胞存活率,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞中LHPP、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和γ-H2AX蛋白表达,双荧光素酶报告系统验证miR-766-5p和LHPP的调控关系.结果 与GES-1相比,miR-766-5p在胃癌细胞系AGS、MGC803、MKN-28和SGC-7901表达量升高[(3.30±0.24)、(2.89±0.19)、(2.05±0.21)、(1.99±0.19)比(1.00±0.10),P<0.05],LHPP mRNA[(0.85±0.09)、(1.01±0.11)、(0.75±0.08)、(0.99±0.10)比(4.46±0.25)]、蛋白表达量[(0.45±0.05)、(0.35±0.05)、(0.30±0.04)、(0.46±0.05)比(1.08±0.12)]降低(P<0.05);抑制miR-766-5p表达可抑制胃癌AGS细胞增殖并增强细胞的放射敏感性;miR-766-5p靶向负调控LHPP的表达;敲减LHPP可逆转anti-miR-766-5p对AGS细胞增殖和放射敏感性的作用.结论 miR-766-5p通过靶向促进LHPP表达增强胃癌AGS细胞的放射敏感性并抑制癌细胞增殖.miR-766-5p有望成为胃癌临床放射增敏靶点.
胃肿瘤;人胃腺癌细胞(AGS);miR-766-5p;组氨酸磷酸酶(LHPP);放射敏感性;增殖
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2022-02-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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