10.3969/j.issn.1009-6469.2021.10.005
白花蛇舌草总黄酮通过下调NOX4表达对前列腺癌细胞侵袭、迁移、EMT的影响
目的 研究白花蛇舌草总黄酮对前列腺癌pc-3细胞侵袭和转移的影响并探讨其分子机制.方法 本研究于2019年3—10月在枣庄矿业集团中心医院实验室进行.分别以0.1 g/L、0.25 g/L、0.5 g/L浓度的白花蛇舌草总黄酮,10μmol/L尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)的抑制剂氯化二亚苯基碘鎓(DPI)(阳性对照)作用于体外培养的前列腺癌pc-3细胞,细胞计数试剂(CCK-8)法分别在24 h、48 h后检测pc-3细胞增殖情况,筛选合适药物作用时间;以Transwell侵袭实验和细胞划痕实验检测白花蛇舌草总黄酮对pc-3细胞侵袭迁移能力的影响;采用免疫印记(WB)法检测上皮间质转化(EMT)标志蛋白钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形纤维蛋白(Vimentin)和NOX4及两面神激酶2(JAK2)/信号转导及转录活化因子3(STAT3)信号通路相关蛋白的表达.结果 与空白对照组相比,白花蛇舌草总黄酮和DPI都能在24h、48h抑制其细胞活力(24h:(92.6±1.62)%比(100.0±1.31)%、(76.9±1.54)%比(100.0±1.31)%、(63.9±1.64)%比(100.0±1.31)%、(61.3±1.44)%比(100.0±1.31)%),差异有统计学意义(P<0.05),且白花蛇舌草总黄酮各浓度之间有浓度依赖性,白花蛇舌草总黄酮高浓度组与DPI组相比,差异无统计学意义(P>0.05),根据CCK-8实验结果选择药物作用pc-3细胞16h继续后续实验;与空白对照组相比,白花蛇舌草总黄酮各浓度和DPI处理pc-3细胞后,pc-3细胞侵袭迁移能力[侵袭(120.32±18.51)个比(174.81±20.13)个、(71.60±10.12)个比(174.81±20.13)个、(32.08±5.17)个比(174.81±20.13)个、(38.13±8.32)个比(174.81±20.13)个;迁移(830.24±80.16)个比(1241.78±120.12)个、(510.23±61.34)个比(1241.78±120.12)个、(280.29±30.18)个比(1241.78±120.12)个、(298.91±40.31)个比(1241.78±120.12)个]降低,E-cadherin蛋白表达[(0.83±0.18)比(0.41±0.12)、(1.26±0.16)比(0.41±0.12)、(2.08±0.19)比(0.41±0.12)、(2.11±0.13)比(0.41±0.12)]升高,Vimentin、NOX4蛋白表达[(0.90±0.18)比(1.21±0.11)、(0.46±0.13)比(1.21±0.11)、(0.28±0.20)比(1.21±0.11)、(0.21±0.23)比(1.21±0.11)]和JAK2/STAT3信号通路相关蛋白p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3降低,差异有统计学意义(P<0.05),且白花蛇舌草总黄酮各浓度之间有浓度依赖性,白花蛇舌草总黄酮高浓度组与DPI组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 白花蛇舌草总黄酮能降低前列腺癌pc-3细胞侵袭转移能力,可能是通过下调NOX4表达实现的.
白花蛇舌草;黄酮类;前列腺癌pc-3细胞;尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4;细胞侵袭转移;上皮间质转化
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2021-10-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1929-1933