微小RNA-21调控同源性磷酸酶-张力蛋白基因表达在子痫前期发病中的作用机制

摘要：

目的 探究微小RNA-21(miR-21)在子痫前期(PE)病人发病中的表达变化及可能作用机制.方法 收集2016年8月至2019年10月郑州市妇幼保健院收治的45例PE病人及45例匹配正常孕妇胎盘组织,采用实时定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-21相对表达水平.体外培养人滋养层细胞系HTR-8/SVneo,转染miR-21模拟物(mimics组),抑制物(inhibitor组)及无意义序列(NC组),另设无任何处理HTR-8/SVneo细胞为空白对照组(BC组).采用Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率,采用Tanswell小室检测细胞侵袭性.生物学分析并进行双荧光素酶报告基因验证miR-21与同源性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)的靶向关系,免疫印迹(WB)法检测胎盘组织及细胞中PTEN、磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)及蛋白激酶B(p-Akt)磷酸化蛋白表达情况.结果 与正常组(0.45±0.06)比较,PE病人胎盘组织中miR-21表达水平(0.41±0.05)显著降低(t=79.157,P<0.05),PTEN mRNA及蛋白表达水平分别为(4.13±0.58)、(0.91±0.08)均显著增加(t=36.201、30.858,P<0.05).PE病人胎盘组织中miR-21与PTEN蛋白表达水平呈负相关(r=?0.542,P<0.05).与BC组、NC组比较,mimics组HTR-8/SVneo细胞侵袭细胞数、p-PI3K、p-Akt蛋白表达水平显著增加,凋亡率、PTEN蛋白表达水平显著降低,inhibitor组呈相反趋势.双荧光素酶报告基因实验结果显示,与转染NC+Wt(1.00±0.00)比较,转染mimics+Wt后HTR-8/SVneo细胞相对荧光活性(0.39±0.04)显著降低(t=37.355,P<0.05).结论 miR-21可通过靶向抑制PTEN表达促进细胞侵袭并抑制其凋亡,可能与促进PI3K/Akt通路激活有关.

关键词：子痫前期、基因、肿瘤抑制、微小RNA-21、同源性磷酸酶-张力蛋白、HTR-8/SVneo细胞

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资助基金：河南省医学科技攻关计划项目2018020716

在线出版日期：2021-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：709-713