利拉鲁肽对结肠癌细胞增殖、凋亡及转录活化因子6通路的影响

摘要：

目的 探究利拉鲁肽对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响及对转录活化因子6(ATF6)通路的影响.方法 按照利拉鲁肽浓度0、10、100、1000 nM培养人结肠癌HCT116细胞24、48、72 h,人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期、凋亡情况,蛋白质印迹法(Western Blot)检测作用后细胞中21KD蛋白(Bax)、半胱胺酸蛋白酶-3(Caspase-3)及ATF6通路蛋白ATF6 p50、CCAAT-增强子结合蛋白(C/EBP)同源蛋白(CHOP)的表达水平.结果 与对照组相比,利拉鲁肽各浓度间增殖率均有显著变化(P<0.05),同一时间点随着利拉鲁肽浓度的增加,0、10、100、1000 nM各组细胞的增殖率分别为(97.16±35.67)％、(81.69±33.37)％、(76.12±30.23)％、(70.65±28.89)％;(86.17±33.98)％、(58.68±26.77)％、(39.74±10.67)％、(30.17±9.24)％;(83.82±31.19)％、(38.77±10.19)％、(22.98±6.78)％、(16.63±6.12)％,均呈下降趋势.同一浓度随着时间推移,24、48、72 h各时间点细胞增殖率分别为(97.16±35.67)％、(86.17±33.98)％、(83.82±31.19)％;(81.69±33.37)％、(58.68±26.77)％、(38.77±10.19)％;(76.12±30.23)％、(39.74±10.67)％、(22.98±6.78)％;(70.65±28.89)％、(30.17±9.24)％、(16.63±6.12)％.不同浓度利拉鲁肽作用于HCT116细胞72 h后,10、100、1000 nM浓度的利拉鲁肽组的G2/M期细胞比例较0 nM组显著减少(P<0.05),且随着浓度的增加G2/M期细胞呈现下降趋势.0、10、100、1000 nM利拉鲁肽作用下细胞凋亡率分别为(9.06±0.98)％、(10.45±1.12)％、(13.89±1.54)％、(56.08±14.33)％,依次升高(P<0.05).与0 nM组比较,10、100、1000 nM浓度的利拉鲁肽组细胞的凋亡率依次显著升高(P<0.05);与10 nM组比较,100、1000 nM组凋亡率依次显著升高(P<0.05);与100 nM组比较,1000 nM组凋亡率显著升高(P<0.05).蛋白质印迹法结果显示,10、100、1000 nM利拉鲁肽作用后细胞中Bax蛋白表达量分别为(0.69±0.13)、(0.93±0.24)、(1.19±0.25),显著升高(P<0.05),1000 nM组Bax蛋白表达量显著高于10 nM组(P<0.05),100、1000 nM两组间差异无统计学意义(P>0.05);Caspase-3蛋白表达量分别为(0.26±0.06)、(0.76±0.15)、(1.15±0.16)依次显著升高(P<0.05),100、1000 nM组Caspase-3蛋白表达量显著高于10 nM组(P<0.05),1000 nM组Caspase-3蛋白表达量显著高于100 nM组(P<0.05);ATF6 p50蛋白表达量分别为(0.69±0.11)、(0.96±0.09)、(1.20±0.08);CHOP蛋白表达量分别为(0.27±0.06)、(0.79±0.08)、(0.99±0.09),均显著升高(P<0.05),100、1000 nM组ATF6 p50、CHOP蛋白表达量显著高于10 nM组(P<0.05),1000 nM组ATF6 p50、CHOP蛋白表达量显著高于100 nM组(P<0.05).结论 利拉鲁肽对结肠癌HCT116细胞具有增殖抑制和凋亡促进作用,且呈时间-剂量的依赖性,其可能通过激活ATF6通路发挥促凋亡作用.

关键词：结肠肿瘤、基因、ras、CCAAT增强子结合蛋白类、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶、原癌基因蛋白质c-bcl-2、细胞增殖、细胞凋亡、利拉鲁肽、转录活化因子6通路

所属期刊栏目：24

在线出版日期：2020-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：438-442,后插3