10.3969/j.issn.1009-6469.2019.09.019
B7-H4在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞侵袭、迁移的影响
目的 探讨新型共刺激分子B7-H4在肝癌组织中的表达情况及其对肝癌细胞侵袭和迁移的影响.方法 (1)收集2013年8月至2019年1月昆明医科大学第二附属医院肝癌组织32例;(2)筛选肝癌细胞系Hep3B,SMMC-7721,Huh-7,PLC/PRF/5等细胞的B7-H4表达情况;(3)筛选并培养高表达的该基因的肝癌细胞株,并使用预先制备好的慢病毒载体抑制该基因表达,将处于对数生长期的高表达的B7-H4肝癌细胞分为对照组、shRNA-1抑制组、shRNA-2抑制组,采用Western Blot(WB)法及实时荧光定量PCR法检测各组B7-H4的相对表达量;采用Tranwell细胞侵袭实验观察各组细胞侵袭能力;采用细胞划痕实验观察各组细胞迁移能力.结果 在临床样本中,B7-H4在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织,且肝癌中B7-H4表达越高,病人越容易复发.HCCLM3的Western Blot相对表达量,对照组(5.32±1.03)、shRNA-1组(1.42±0.29)、shRNA-2组(2.06±0.68),shR-NA-1组、shRNA-2组均被抑制,shRNA-1组抑制明显(P<0.05).HCCLM3对照组的细胞数为(365±21)、shRNA-1组(128±8);PLC/PRF/5组的细胞数为(267±44)、shRNA-1组(79±12).与对照组相比较,shRNA-1组可明显抑制HCCLM3和PLC/PRF/5的细胞侵袭能力(P<0.01).HCCLM3对照组的细胞迁移率为(82%±13%)、shRNA-1组(44%±6%);PLC/PRF/5对照组细胞迁移率为(77%±9%)、shRNA-1组(41%±6%).与对照组比较,shRNA-1组明显抑制HCCLM3和PLC/PRF/5的细胞迁移能力(P<0.05).转染抑制该基因后其相对表达量、细胞侵袭能力、迁移能力均下降.结论 B7-H4有望成为新的肝癌预后标志物,下调肝癌细胞B7-H4的表达可以减弱肝癌细胞侵袭和迁移能力.
肝癌、共刺激分子B7-H4、病理、细胞侵袭、细胞迁移
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云南省教育厅科学研究基金项目2019J0567;云南省科学技术厅科技计划项目2014FZ026;云南省医疗卫生单位内设研究机构科研项目2016NS248,2017NS281;昆明学院引进人才科研项目YJL18019
2019-09-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
1774-1778,后插3